Artemisiinin kvantitatiivinen LC-MS/MS-analytiikka
Suuronen, Siiri (2024-05-04)
Artemisiinin kvantitatiivinen LC-MS/MS-analytiikka
(04.05.2024)
Julkaisu on tekijänoikeussäännösten alainen. Teosta voi lukea ja tulostaa henkilökohtaista käyttöä varten. Käyttö kaupallisiin tarkoituksiin on kielletty.
avoin
Julkaisun pysyvä osoite on:
https://urn.fi/URN:NBN:fi-fe2024050828111
https://urn.fi/URN:NBN:fi-fe2024050828111
Tiivistelmä
Artemisiini on kesämarunasta (Artemisia annua) alun perin eristetty seskviterpeenilaktoni. Erityisen kemiallisen rakenteensa vuoksi artemisiini on merkittävä ja tehokas lääkeaine malarian hoidossa. Sen lisäksi, että artemisiinilla on antimalaarinen vaikutus, on sillä havaittu olevan potentiaalia virus- ja syöpälääkkeenä. Artemisiinin pitoisuus kasvissa voi olla usein alhainen ja vaihteleva. Näiden syiden vuoksi on tärkeä pystyä määrittämään, missä marunalajissa tai kasvinosissa artemisiinipitoisuus on korkeimmillaan, jotta artemisiinia voitaisiin hyödyntää tehokkaasti.
Kasveissa esiintyvän alhaisen artemisiinipitoisuuden vuoksi näytteiden esikäsittely- ja analyysivaiheet pitää suunnitella huolellisesti. Esikäsittelyvaiheet pitävät usein sisällään uuton ja uutteen puhdistamisen, joiden avulla voidaan erottaa ja puhdistaa artemisiini muista komponenteista. Analyysivaiheessa artemisiinille suosittu menetelmäkokonaisuus on ollut nestekromatografia (LC) yhdistettynä tandemmassaspektrometriaan (MS/MS). LC-menetelmistä erittäin korkean erotuskyvyn nestekromatografia (UHPLC) on osoittautunut varteenotettavaksi vaihtoehdoksi perinteisimmille menetelmille. Massaspektrometriassa kolmoiskvadrupoli-massaspektrometria (QqQ-MS) ja usean reaktion seuraaminen (Multiple Reaction Monitoring, MRM) on mahdollistanut artemisiinin selektiivisen kvantitoinnin.
Luotettavan kvantitatiivisen tuloksen saamiseksi käytetään isotooppileimattua sisäistä standardia (IS) ja sen avulla muodostettua kalibraatiokäyrää. IS:n avulla voidaan korjata näytteenvalmistuksessa mahdollisesti syntyneet häviöt, ja kalibraatiokäyrältä voidaan määrittää artemisiinin pitoisuus, joka on suoraan verrannollinen artemisiinin ja IS:n vasteiden suhteeseen.
Kasveissa esiintyvän alhaisen artemisiinipitoisuuden vuoksi näytteiden esikäsittely- ja analyysivaiheet pitää suunnitella huolellisesti. Esikäsittelyvaiheet pitävät usein sisällään uuton ja uutteen puhdistamisen, joiden avulla voidaan erottaa ja puhdistaa artemisiini muista komponenteista. Analyysivaiheessa artemisiinille suosittu menetelmäkokonaisuus on ollut nestekromatografia (LC) yhdistettynä tandemmassaspektrometriaan (MS/MS). LC-menetelmistä erittäin korkean erotuskyvyn nestekromatografia (UHPLC) on osoittautunut varteenotettavaksi vaihtoehdoksi perinteisimmille menetelmille. Massaspektrometriassa kolmoiskvadrupoli-massaspektrometria (QqQ-MS) ja usean reaktion seuraaminen (Multiple Reaction Monitoring, MRM) on mahdollistanut artemisiinin selektiivisen kvantitoinnin.
Luotettavan kvantitatiivisen tuloksen saamiseksi käytetään isotooppileimattua sisäistä standardia (IS) ja sen avulla muodostettua kalibraatiokäyrää. IS:n avulla voidaan korjata näytteenvalmistuksessa mahdollisesti syntyneet häviöt, ja kalibraatiokäyrältä voidaan määrittää artemisiinin pitoisuus, joka on suoraan verrannollinen artemisiinin ja IS:n vasteiden suhteeseen.